Conţinut
Studiile cu culturi microbiene necesită adesea identificarea organismelor prezente în ele. Când o mică porțiune din cultură este introdusă pe agar care conține un mediu nutritiv, este posibilă separarea unei mase de bacterii în unități individuale care formează colonii. Fiecare dintre aceste unități se dezvoltă în colonii discrete, care prezintă caracteristici care ajută la identificarea organismului.
Scop
Studiile de microbiologie necesită studiul morfologiei anumitor organisme. În unele cazuri, organismele prezente într-o cultură mixtă trebuie separate înainte de a putea fi analizate. Astfel, este important să se izoleze aceste colonii microbiene. Culturile bacteriene conțin un număr mare de celule într-o singură picătură. Semănatul prin epuizare pe o placă de agar le diluează, astfel încât o singură celulă bacteriană este depusă într-o zonă specifică a plăcii. Mai multe dintre aceste celule individuale sunt separate de câțiva milimetri între ele. Fiecare dintre ele se împarte pentru a forma mii de celule noi, dând naștere coloniilor izolate.
Principiu
Placa de agar asigură un mediu bogat în substanțe nutritive care stimulează creșterea și multiplicarea microorganismelor. Sămânțarea apelor uzate utilizează metoda de striație a cadranului, în care întreaga placă este împărțită în patru cadrane. Pe măsură ce treceți de la un cadran la altul, există o diluare treptată a culturii originale pe întreaga suprafață disponibilă. Cadrantul în care începeți prezintă o creștere microbiană densă și nedistinguită, care arată ca un covor de microorganisme, în timp ce ultimul prezintă colonii izolate.
Materiale
Semințele de evacuare necesită plăci de agar nutritiv, o buclă pentru inoculare, cultura bacteriilor, o soluție dezinfectantă, cum ar fi Lysol 10% și un arzător Bunsen. De asemenea, veți avea nevoie de echipamente de siguranță, precum șorț, mănuși și ochelari de protecție. Inoculul pentru formarea vergeturilor se face din cultura bacteriilor folosind bucla și zgâriind plăcile de agar nutritiv. Arzătorul Bunsen este destinat flăcării mânerului în timpul canelurilor. Utilizați soluția dezinfectantă pentru a curăța suprafața înainte de a începe experimentul.
Metodă
Utilizați o cantitate mică de inocul pentru a semăna în primul cadran cu o mișcare înainte și înapoi. Flacărați mânerul și lăsați-l să se răcească, atingându-l de o parte a plăcii de agar care nu a fost inoculată. Atingeți-l până la un capăt al zonei pe care tocmai l-ați semănat și întindeți-l de acolo până la al doilea cadran. Flacărați și răcoriți din nou bucla și, din a doua zonă, lucrați al treilea cadran. Repetați același proces cu al patrulea cadran.
